Pipety to sprzęt laboratoryjny służący do pomiaru i przenoszenia bardzo małych objętości cieczy. Dokładność pomiarów pipetami jest bardzo ważna, ponieważ różnice w objętości upuszczonej przez pipetę mogą wpływać na wyniki eksperymentalne. Aby zapewnić dokładność, ważne jest, aby co kilka miesięcy sprawdzać kalibrację pipety. Proces kalibracji jest przydatny do sprawdzania, czy z tego sprzętu kapie ciecz w odpowiedniej objętości, aby w razie potrzeby można było dokonać napraw.
Krok
Część 1 z 2: Sprawdzanie kalibracji
Krok 1. Zbierz niezbędne materiały
Aby sprawdzić kalibrację pipety, potrzebna jest pipeta, końcówki do pipet, woda destylowana, zlewka, termometr, waga i kubek do ważenia. Używana waga musi być w skali mikrogramowej, aby skalibrować mikropipetę o wartości maksymalnej 1 l.
- Nie będziesz potrzebować więcej niż 5 ml wody. Napełnij zlewkę wodą.
- Upewnij się, że końcówka pipety jest prawidłowa i dobrze pasuje do pipety.
Krok 2. Zmierz temperaturę wody destylowanej
Włóż termometr do wody i pozostaw na co najmniej minutę. Jeśli czerwona linia termometru nadal się porusza, odczekaj kolejną minutę. Po minucie zanotuj temperaturę. Po zakończeniu weź termometr i wysusz go.
Ważne jest, aby znać temperaturę wody, ponieważ będzie ona wykorzystywana do obliczeń wykonywanych w celu sprawdzenia kalibracji
Krok 3. Umieść naczynie wagowe na wadze i wyzeruj wagę
Idealnie, zastosowana waga ma drzwi i izolowaną przestrzeń wewnątrz. Włóż naczynie wagowe do komory wagi i zamknij drzwiczki. Jeśli Twoja waga nie ma kabiny i drzwi, po prostu połóż na wadze kubek do ważenia. Naciśnij przycisk „Zero” lub „Tara” i poczekaj, aż waga pokaże zero.
Zerowanie wagi zmniejsza wagę plastikowego kubka i pozwala zważyć tylko masę substancji umieszczonej w kubku
Krok 4. Przygotuj pipetę do kalibracji
Przed rozpoczęciem przetrzyj pipetę etanolem i upewnij się, że nic nie zatyka końcówki pipety. Załóż odpowiednią końcówkę pipety na końcówkę pipety i określ badaną objętość.
W celu kalibracji przetestuj najmniejszą i największą objętość, którą można usunąć z pipety
Krok 5. Umyj końcówkę pipety przed jej kalibracją
Naciśnij przycisk do pierwszej granicy i zanurz końcówkę pipety w wodzie destylowanej na głębokość około 2 mm. Zwolnij przycisk, aby wchłonąć trochę płynu, a następnie ponownie wypuść płyn, naciskając przycisk. Powtórz ten krok trzy razy, aby umyć końcówki zakraplacza przed użyciem.
Naciśnij przycisk do drugiego limitu, aby usunąć pozostałą ciecz z końcówki pipety, a następnie wyjmij pipetę z wody
Krok 6. Zassać objętość kalibracji
Ustaw końcówkę pipety poza wodą destylowaną, naciśnij przycisk do pierwszego limitu. Zanurz końcówkę pipety na głębokość 2 mm w wodzie destylowanej i zwolnij przycisk, aby zassać płyn do końcówki pipety. Odczekaj około 1 sekundy przed wyjęciem końcówki zakraplacza z wody.
Upewnij się, że końcówka pipety jest całkowicie zanurzona podczas procesu aspiracji. W końcówce zakraplacza nie powinno być pęcherzyków lub wynik może być nieprawidłowy
Krok 7. Wlej płyn do szalki wagowej na wadze
Umieść końcówkę pipety na dnie kubka wagi, a następnie naciśnij przycisk pipety do pierwszego limitu. Przenieś się do kolejnego punktu, nieco oddalonego od wody, a następnie wciśnij przycisk do drugiego limitu. Trzymając wciśnięty przycisk, wyjmij końcówkę pipety z kubka ważącego.
Trzymaj końcówkę przymocowaną do pipety, ponieważ będziesz jej używać ponownie do innych testów kalibracyjnych
Krok 8. Zapisz wagę pokazaną na wadze
Zamknij drzwi kabiny wagi, jeśli używasz wagi drzwiowej. Poczekaj, aż liczby już się nie zmienią. Napisz w swoim notatniku.
Ważne jest, aby poczekać, aż liczby na skali ponownie się nie zmienią, zanim je zapiszesz. Notatki pójdą źle, jeśli nie będziesz czekać
Krok 9. Powtórz ten proces, aby wykonać odczyt co najmniej 10 razy
Ponownie wyzeruj wagę, umyj końcówki pipet przed użyciem, zassaj taką samą objętość płynu, usuń objętość, a następnie zanotuj wagę. Zapisz wagę wody destylowanej dla tej samej objętości, a następnie uśrednij wszystkie notatki.
Możesz powtórzyć ten proces dla różnych woluminów, jeśli każdy wolumin jest testowany wiele razy
Część 2 z 2: Obliczanie wyniku kalibracji
Krok 1. Zdefiniuj wzór na obliczoną objętość
Wzór na obliczenie objętości cieczy wyrzucanej przez pipetę to V = w * Z, w to masa wody, Z to przelicznik oparty na gęstości wody, natomiast V to objętość ilości wody REMOVED.
- Zmienną Z można otrzymać obliczając gęstość wody na podstawie temperatury zarejestrowanej na początku eksperymentu.
- Na przykład: Jeśli temperatura wody wynosi 23°C, wartość Z wynosi 1,0035 g/mg.
Krok 2. Oblicz ogólną średnią kalibracji pipet
Objętość wody uwalnianej przez pipetę została zważona co najmniej dziesięciokrotnie. Aby uśrednić wszystkie te wartości, dodaj je wszystkie razem i podziel przez 10. Jeśli wykonałeś więcej lub mniej procesu, zsumuj ogólne wyniki, a następnie podziel przez liczbę wykonanych prób.
- Na przykład: Waga wody z 10 eksperymentów przeprowadzonych z pipetą 10 µL jest następująca: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 i 9, 98.
- Średnia wynosi: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95 + 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9984
Krok 3. Podłącz zmienne do równania i rozwiąż
Po ustaleniu prawidłowej liczby dla każdej zmiennej wstaw ją do wzoru i uzupełnij obliczoną objętość. Aby rozwiązać to równanie, po prostu pomnóż średnią wagę wszystkich prób przez wartość Z.
Na przykład: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10, 019
Krok 4. Oblicz dokładność pipety
Użyj równania A = 100 x Vśredni/V0 aby obliczyć dokładność pipety. A wskazuje dokładność pipety, Vśredni jest obliczoną średnią objętością, a V0 to wartość ustawiona na pipecie. Wartość dokładności powinna zawierać się w przedziale 99-101%.
- Jeśli pipeta jest prawidłowo skalibrowana, obliczona wartość powinna być bardzo zbliżona do rzeczywistej wartości ustawionej na pipecie.
- Na przykład: A = 100 x Vśredni/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Ta pipeta jest prawidłowo skalibrowana.
Krok 5. W razie potrzeby wyślij pipetę do kalibracji
Jeśli twoja pipeta nie przejdzie testu kalibracyjnego, nie używaj jej teraz do eksperymentów. Pipety są bardzo delikatnym i drogim sprzętem laboratoryjnym. Kalibracji nie da się naprawić samodzielnie, pipetę trzeba wysłać do naprawy. Alternatywnie, kilka firm przyjedzie do Twojego laboratorium i skalibruje pipetę na miejscu.
