Istnieje wiele sposobów mierzenia wzrostu bakterii, a jeden z nich jest bardziej skomplikowany od drugiego. Chociaż czasami należy zignorować spójność pomiaru, najprostszy sposób jest wystarczający do dokładnego pomiaru wzrostu bakterii, dlatego jest często stosowany. Najczęściej stosowanymi metodami są monitorowanie i liczenie bakterii, pomiar suchej lub mokrej masy oraz pomiar poziomu zmętnienia/zmętnienia. Laboratorium w Twojej szkole powinno mieć narzędzia i sprzęt potrzebny do wykonania przynajmniej jednego z tych eksperymentów.
Krok
Metoda 1 z 3: Monitorowanie żywych bakterii
Krok 1. Przygotuj składniki
Istnieje wiele specjalnych narzędzi, które należy przygotować i które mogą nie być dostępne w laboratorium biologicznym. Przygotuj cały sprzęt i pojemniki przed uruchomieniem eksperymentu, aby nie było kłopotów podczas procesu. Musisz znać każdy składnik, który jest używany od razu, oraz podstawowe terminy tego eksperymentu.
- Przygotuj komorę zliczeniową. Posiada wbudowaną komorę, szkło mikroskopu i mikroskop, dzięki czemu jest łatwy w konfiguracji i obsłudze. Możesz go kupić w laboratorium lub sklepie z artykułami szkolnymi. To narzędzie powinno zawierać instrukcje, które poprowadzą Cię przez cały proces.
- Przygotuj kubek do nalewania lub kubek do smarowania. Oba te pojemniki pozwalają monitorować znajdujące się w nich bakterie.
- Kultura to termin używany do opisania wzrostu organizmów w eksperymencie.
- Bulion to płynna pożywka, w której rośnie kultura.
Krok 2. Stosuj metodę talerza lanego lub talerza rozprowadzającego
Możesz również umieścić bakterie bezpośrednio na szalce do oglądania pod mikroskopem. Wylej kulturę na spodek i umieść pod mikroskopem. Monitoruj liczbę obecnych komórek bakteryjnych.
Krok 3. Upewnij się, że dawka stężenia jest odpowiednia
Jeśli jest ich zbyt wiele, bakterie będą się nawarstwiać i możesz przeliczyć. Rozcieńczyć kulturę dodając więcej bulionu. Jeśli jest ich zbyt mało, wyniki obliczeń nie będą dokładne. Odcedź bulion za pomocą systemu filtracji.
Krok 4. Policz bakterie
Ostatnim krokiem jest liczenie bakterii jedna po drugiej. Spójrz przez szkło powiększające w komorze zliczającej i zapisz liczbę bakterii, które widzisz. Porównaj wyniki z wynikami innych testów.
Metoda 2 z 3: Pomiar suchej i mokrej masy
Krok 1. Upewnij się, że masz odpowiedni sprzęt
Ta metoda wykorzystuje drogi sprzęt i dużo czasu. Jeśli twoje laboratorium nie ma potrzebnego sprzętu, dobrym pomysłem jest skorzystanie z innej metody. Jeśli jednak laboratorium jest wystarczająco dobrze wyposażone, zalecamy tę metodę, ponieważ zapewnia ona bardziej spójne wyniki. W tej metodzie będziesz potrzebować:
- Hydrauliczny piec konwekcyjny grawitacyjny
- Pojemnik ważący wykonany z aluminium
- Komplet kolb (butelki laboratoryjne)
- Maszyna wirówkowa (wirówka) lub laboratoryjny system filtracji
Krok 2. Upewnij się, że kultura jest w kolbie
Dodaj kulturę do dyni. Na tym etapie kultura powinna być bulionem, chociaż później zostanie ponownie oddzielona.
Krok 3. Wysuszyć aluminiowy pojemnik wagowy w piecu laboratoryjnym
Zamiast tego można zastosować membranę filtracyjną z octanu celulozy o średnicy 47 mm i wielkości porów 0,45 µm. Niezależnie od używanego pojemnika do ważenia, zważ go, ponieważ będzie musiał zostać odliczony później podczas ważenia komórek bakteryjnych.
Krok 4. Mieszaj kulturę w kolbie, aż zostanie równomiernie wymieszana
Komórka opadnie naturalnie pod wpływem grawitacji i będzie musiała zostać wymieszana, aby równomiernie rozprowadzić się w kolbie. W ten sposób możesz mieć więcej próbek.
Krok 5. Użyj wirówki, aby oddzielić komórki bakteryjne od bulionu
To narzędzie obraca kolbę i szybko równoważy się tak, że spuszcza bulion i pozostawia kulturę w kolbie.
Krok 6. Zeskrob pastę z dyni i włóż ją do pojemnika do ważenia
Wyrzuć bulion, bo już go nie potrzebujesz. Jednak nie pozbywaj się jeszcze dyni, ponieważ nadal będzie używana.
Krok 7. Opłucz wirówkę i wlej wodę do płukania do pojemnika
Upuść wodę do płukania w kolbie na komórki bakteryjne, aby uzyskać mokrą masę.
Krok 8. Znajdź suchą masę
Aby zmierzyć suchą masę, umieść pojemnik w piekarniku i susz w temperaturze 100ºC przez 6-24 godziny zgodnie z instrukcją z piekarnika i/lub używanego pojemnika wagowego. Upewnij się, że temperatura nie jest zbyt wysoka, aby bakterie się nie spaliły. Po zakończeniu zważ bakterie i nie zapomnij pomniejszyć wyniku o wagę pojemnika do ważenia.
Metoda 3 z 3: Pomiar mętności
Krok 1. Przygotuj niezbędny sprzęt
Będziesz potrzebował źródła światła i spektrofotometru. Oba można nabyć w sklepach z zaopatrzeniem laboratoryjnym. Spektrofotometr powinien mieć instrukcje, które poprowadzą Cię w obsłudze przyrządu zgodnie z posiadanym modelem. Cena spektrofotometru jest dość przystępna i łatwa w użyciu, dzięki czemu może stać się jedną z najczęściej stosowanych metod pomiaru wzrostu bakterii.
Krok 2. Podświetl próbkę
Zgodnie z terminem Laymana zmętnienie to poziom zmętnienia próbki. Musisz uzyskać numer pomiaru zmętnienia, który jest mierzony w NTU (nefelometryczna jednostka zmętnienia). To narzędzie musi zostać skalibrowane, zanim będzie mogło dokładnie zmierzyć próbkę.
Krok 3. Zapisz wyniki
Zmętnienie zależy od liczby bakterii w próbce. Spektrofotometr pokaże również procent transmisji (%T). Liczba ta wzrośnie, jeśli zmętnienie się zmniejszy. Porównaj wyniki z wynikami innych testów, aby zmierzyć wzrost bakterii.
Ostrzeżenie
- Ponieważ masz do czynienia z kolonią bakteryjną, zachowaj środki ostrożności, nosząc sprzęt ochronny, taki jak okulary i rękawice ochronne. Dobrym pomysłem jest również noszenie maski, zwłaszcza jeśli nie znasz rodzaju badanej bakterii.
- Podejmij środki ostrożności przed obchodzeniem się z jakimkolwiek rodzajem bakterii, nawet nieszkodliwym. Przed rozpoczęciem upewnij się, że wszystkie otwarte rany na ciele są całkowicie zakryte.
